PCR實驗室
PCR實驗室由緩沖區及四個單獨的工作區域
緩沖區、試劑儲存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區。為避免交叉污染，進入各個工作區域必須嚴格遵循單一方向進行，即只能從試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。
PCR實驗室空調通風系統設計及壓力控制
PCR實驗室關鍵控制好各個實驗區域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。要嚴格控制送、排風的比例以保住各實驗區的階梯式壓力要求及達到安全排放標準。
Pcr實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統，能迅速掌握患者體內的病毒含量，其精確度高達納米級別，精確檢測乙肝病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床緩解提供了可靠的檢驗依據
PCR實驗室建立方法
1、建立樣品準備區
這個區域專門用作樣品的準備，在制備和操作用于核酸提取的試劑時應該采取預防措施:⑴PCR產物和帶有要擴增序列的DNA克隆不能在這個房間操作。⑵組織培養物、組織標本和血清樣品都帶進樣品準備間處理，以根據應用的需要提取DNA或RNA。⑶用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序列。⑷DNA樣品應該用有專門的防護或正壓活塞式移液管操作，以防止在吸取樣品時有氣溶膠遺留。⑸大體積樣品應該用單獨包裝的無菌一次性移液管吸取。⑹管子打開前都要簡短離心以減少氣溶膠的產生，而且管子不能用力崩開，這樣會產生氣溶膠。⑺任何時候都應該穿實驗服和帶手套，手套要經常更換，尤其在抽提過程中每一步之間都要更換。實驗服要專門用于樣品準備間，經常清洗。
2、樣品準備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作，這樣增加了樣品之間污染的機會。為了避免這一問題，反轉錄一步可以在樣品準備區進行。在RNA-PCR中應用UNG以防止污染的方法也有報道。
3、建立前PCR區。
該去專門用于準備各種反應，這個區域必須保持干凈，而且沒有來自克隆和樣品準備的污染。前PCR區必須要有試劑和準備，特別是專門用于前PCR區的正壓活塞式移液管。
4、PCR實驗室試劑的操作。
⑴所用的所有溶液都應該沒有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。⑵所有PCR試劑中使用的水都應該是高質量的-新鮮蒸餾的去離子水，用0.22μm過濾的，并且是高壓滅菌。⑶在20℃到25℃貯存的試劑建議加點像疊氮鈉一類的抗微生物劑，在擴增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴增反應。⑷所用試劑都應該以大體積配制，實驗一下看試劑是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量進行貯存。⑸所有試劑和樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。⑹新配制的試劑在用于準備新的標本之前應該加以檢驗。⑺樣品準備和前PCR區所使用的移液管在不使用時都應該小心保存。
5、在前PCR區建立PCR混合物。
⑴可以把即刻可用的"主混合物"溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃，在實驗室只涉及到擴增一種或少數幾種特異序列時這樣做很有用。⑵如果你的實驗室使用多套引物，以致于配制包括所有試劑的單一反應混合物不夠經濟，可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。⑶作為一個規則，應該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且，你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴增抑制物。⑷陰性樣品要與每組樣品同時做，以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產物的污染，陰性對照應該包括核酸以外的所有試劑。⑸當做陽性對照時，有兩個理由決定了應該使用少數量的核酸。⑹由于必須有對照反應，對照模板的特點應該予以考慮。
6、控制污染的方法。
已設計出很有力的酶學方法用來消除一種形式的污染-使用UNG，這一技術能有效地消除由PCR產物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線，這種方法不能完全消除污染問題，但可以將污染降低幾個數量級。
7、后PCR區PCR完成以后，需要分析樣品并解釋數據，應該留出一個專門用于反應后處理樣品的地方。后PCR活動中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門用于這一目的，決不能把實驗室這一區域的試劑或儀器用于任何前PCR活動
PCR實驗室標準
基因擴增實驗又稱PCR實驗，其特點是能將微量的DNA大幅增加，PCR是分子生物學研究和實驗的常規方法,廣泛應用于生物學各個領域，如：檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病，癌基因的檢測和診斷，DNA指紋、個體識別、親子鑒別及法醫物證，動、植物檢疫，動物及其衍生產品檢測，動物飼料、化妝品、食品衛生檢測，轉基因作物與轉基因微生物檢測等。
PCR設計依據
《醫療機構臨床基因擴增管理法》
《生物安全實驗室建筑技術規范》 GB50346-2004
《潔凈廠房設計規范》GB50073-2001
《空氣過濾器》GB13554-92
《實驗室生物安全通用要求》GB19489-2004
《微生物和生物醫學實驗室生物安全通用準則》WS233-2002 中華人民共和國衛生部
PCR實驗室平面布
基因擴增實驗室又稱PCR實驗室，實驗室原則上分為四個單獨的工作區域，前兩區為擴增前區，后兩區為擴增后區。擴增前區與擴增后區應嚴格分開。實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴增前區流向擴增后區，即從試劑準備區->樣品處理區->擴增區->擴增產物分析區，不得逆向流動。實驗室的氣流也應從擴增前區流向擴增后區，不得逆向流動。各工作區域應設置緩沖間，工作間與緩沖間之間宜安裝連鎖裝置。不同功能的核酸檢驗工作區應是分隔獨立的工作室，并有明顯的標志，各區間不能直通。各區之間如果是緊密相連，需安裝物品傳遞窗。每個工作區域的頂部應安裝紫外燈，紫外燈的波長為254 nm，安裝數量為每20 m2安裝一支40W的紫外燈。
實驗室較為理想的布局模式為有一個專用走廊，試劑準備區、標本制備區、擴增區和產物分析區很規范地排列在一起，前三個區各有一個緩沖間，可供換工作服和工作鞋使用，頂上可裝一紫外燈。內實驗區域設為正壓或常壓狀態，緩沖間內設為負壓狀態（可上設一抽風裝置），使這三個區的空氣流向為由實驗區域內向外，緩沖間內通向內實驗室和走廊的門可安裝一種連鎖裝置，當一個門打開時，另一門必須處于關閉狀態，防止出現兩個門同時打開的情況。產物分析區可不設緩沖間，但應設為負壓狀態（裝一個排風扇即可），使空氣流向由外向內，以防止擴增產物的隨空氣流出。每一區域都須有明確的標記，工作按試劑準備區、標本制備區、擴增區至產物分析區單一流向進行，各區的儀器設備包括工作服、鞋、實驗記錄本和筆等都必須專用。
如果無法作到以上模式，以下基本要求必須做到：
1.四個區域必須是相互獨立的；
2.各區的儀器設備及各種物品必須是專用的；
3.各區完全獨立，緩沖間可有可無。如為一個區套一個區的模式，區間不能直通，應有緩沖間，供換工作服及鞋子用，并保證兩個區域間始終處于完全的分隔狀態；
4.產物分析區應安裝排風扇或其它抽風裝置，維持負壓。
實驗室空調通風系統設計及壓力控制
各個區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產生假性結果。PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求，但是為避免各個實驗區域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時，要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。
實驗室裝修
實驗室的墻體，包括頂棚，應結構牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過渡；墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
實驗室邊臺產品參數
產品名稱 益陽實驗臺 材質 鋼木結構
設計用途 實驗室操作平臺 生產地區 廣東深圳
尺寸 根據客戶的實際需要X750/1500X850mm 執行標準 實驗室行業標準
產品描述：
選用優質C字型方鋼框架和環保型中密度板制造的益陽鋼木實驗臺，益陽實驗臺。臺面耐酸堿、抗腐蝕，承載力強是湖南省益陽市企事業單位可以選擇的實驗室操作臺之一。
產品材料詳細配置說明如下：
實驗臺框架是以優質C型鋼為支撐，所以也簡稱益陽鋼木實驗臺。
1、框架：采用40x60x1.5mm厚優質鋼材，經牢固焊接，表面酸洗、磷化、電泳、防銹處理、環氧樹脂高壓靜電粉末噴涂。具有防腐性好、緊密堅固、美觀、承載力≥300kg等特點。
2、臺面：采用國際、實驗室行業通用_實芯理化板。其耐化學腐蝕、耐高溫180℃，抗刻刮性能好。
3、箱體：板材采用優質中密度板，所有箱體板和門、抽屜面板均雙面粘壓三聚氰胺板，全部截面PVC熱熔膠防水封邊處理，具有防腐、防火、防蛀等性能。
4、柜底離地面約150mm，可微調，便于地面清掃。
5、不銹鋼承重可調節高度地腳，調整范圍>30mm。
6、臺面：還可以選用更加耐酸堿，抗腐蝕的環氧樹脂板、陶瓷臺面板等產品。
微生物實驗室設計
微生物實驗室由準備室、洗滌室、滅菌室、無菌室、恒溫培養室和普通實驗室六部分組成。這些房間的共同特點是地板和墻壁的質地光滑堅硬，儀器和設備的陳設簡潔，便于打掃衛生。
二、微生物實驗室基本要求
（一）準備室
準備室用于配制培養基和樣品處理等。室內設有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實驗臺、電爐、冰箱和上下水道、電源等。
（二）洗滌室
洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過的器皿已被微生物污染，有時還會存在病原微生物。因此，在條件允許的情況下，好設置洗滌室。室內應備有加熱器、蒸鍋，洗刷器皿用的盆、桶等，還應有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
（三）滅菌室
滅菌室主要用于培養基的滅菌和各種器具的滅菌，室內應備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設備及設施。
（四）無菌室
無菌室也稱接種室，是系統接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。在微生物工作中，菌種的接種移植是一項主要操作，這項操作的特點就是要保證菌種純種，防止雜菌的污染。在一般環境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，很易造成污染，對接種工作干擾很大。
1. 無菌室的設置
無菌室應根據既經濟又科學的原則來設置。其基本要求有以下幾點：
（1）無菌室應有內、外兩間，內間是無菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過大，以便于空氣滅菌。小內間面積2*2.5＝5m2，外間面積1*2＝2m2，高以2.5m以下為宜，都應有天花板。
（2）內間應當設拉門，以減少空氣的波動，門應設在離工作臺遠的位置上；外間的門好也用拉門，要設在距內間遠的位置上。
（3）在分隔內間與外間的墻壁或隔扇上，應開一個小窗，作接種過程中必要的內外傳遞物品的通道，以減少人員進出內間的次數，降低污染程度。小窗寬1500px、高1000px、厚750px，內外都掛對拉的窗扇。
（4）無菌室容積小而嚴密，使用一段時間后，室內溫度很高，故應設置通氣窗。通氣窗應設在內室進門處的頂棚上（即離工作臺遠的位置），好為雙層結構，外層為百葉窗，內層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內室使用后、滅菌前開啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機。
2. 無菌室內設備和用具
（1）無菌室內的工作臺，不論是什么材質、用途的，都要求表面光滑和臺面水平。
（2）在內室和外室各安裝一個紫外燈（多為30W）。內室的紫外線燈應安裝在經常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線燈可安裝在外室中央。
（3）外室應有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。
（4）內室應有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標簽紙、膠水、廢物筐等。
3. 無菌室的滅菌消毒
（1）薰蒸：這是無菌室滅菌的措施。無菌室使用了較長時間，污染比較嚴重時，應進行薰蒸滅菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。
（2）噴霧：在每次使用無菌室前進行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微塵飛場，并有殺菌作用。可用5%石炭酸噴霧。
（3）紫外線照射：在每次使用無菌室前進行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應開啟紫外線燈照射30～60min。
4. 無菌室工作規程
（1）無菌室滅菌。每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上，或在使用前30min，對內外室用5%石炭酸噴霧。
（2）用肥皂洗手后，把所需器材搬入外室；在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。
（3）將各種需用物品搬進內室清點、就位，用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧，返回外室，5～10min后再進內室工作。
（4）接種操作前，用70%酒精棉球擦手；進行無菌操作時，動作要輕緩，盡量減少空氣波動和地面揚塵。
（5）工作中應注意安全。如遇棉塞著火，用手緊握或用濕布包裹熄滅，切勿用嘴吹，以免擴大燃燒；如遇有菌培養物灑落或打碎有菌容器時，應用浸潤5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面，用酒精棉球擦手后再繼續操作。
（6）工作結束，立即將臺面收拾干凈，將不應在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室后，對無菌室用5%石炭酸噴霧，或開紫外線燈照射30min。
（五）恒溫培養室
1. 培養室的設置
（1）培養室應有內、外兩間，內室是培養室，外室是緩沖室。房間容積不宜大，以利于空氣滅菌，內室面積在3.2*4.4＝14m2左右，外室面積在3.2*1.8＝6m2左右，高以2.5m左右為宜，都應有天花板。
（2）分隔內室與外室的墻壁上部應設帶空氣過濾裝置的通風口。
（3）為滿足微生物對溫度的需要，需安裝恒溫恒濕機。
（4）內外室都應在室中央安裝紫外線燈，以供滅菌用。
2. 培養室內設備及用具
（1）內室通常配備培養架和搖瓶機（搖床）。常用的搖瓶機有旋轉式、往復式兩種。
（2）外室應有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。
3. 培養室的滅菌、消毒 同無菌室的滅菌、消毒措施。小規模的培養可不啟用恒溫培養室，而在恒溫培養箱中進行。
（六）普通實驗室
進行微生物的觀察、計數和生理生化測定工作的場所。室內的陳設因工作側重點不同而有很大的差異。一般均配備實驗臺、顯微鏡、柜子及凳子。實驗臺要求平整、光滑，實驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。
（七）實驗室其他要求
水、電、氣等的容量、布設、性能均應滿足實驗室工作的需要。
鋼木實驗臺：
產品參數：
產品名稱 鋼木實驗臺 材質 鋼木結構
設計用途 實驗室工作平臺 生產地區
尺寸 根據客戶實際需要X750/1500X850mm 執行標準 實驗室行業標準
產品描述
選用優質鍍鋅方鋼框架和環保型中密度板，實驗室專用實芯理化板臺面制造的鋼木實驗臺，外形美觀。
產品材料詳細配置說明如下：
1、臺面：優質實芯理化板厚12.7mm，臺面邊緣加厚至25.4mm，耐酸堿防腐蝕;
2、框架：采用40*60mm冷軋鋼框架結構，表面酸洗、磷化后高壓靜電粉末噴涂;
3、箱體：采用優質中密度板，雙面粘壓三聚氰胺板，PVC熱熔膠封邊，總厚15mm;
4、地腳：采用不銹鋼與尼龍組合一體的可調地腳，具有防滑減震，高低可調的功能，可調高度50mm;
5、滑道：采用優質靜音三級滑道;
6、鉸鏈：廣東省優質DTC五金115°全開式金屬鉸鏈;
7、拉手：鋁合金暗拉手。
GMP無菌潔凈實驗室
GMP領域的常規品質控制區，它與生產區、倉儲區、辦公區、水電氣動力區構成常見的GMP工廠（藥廠、醫療器械廠、食品廠、化妝品廠等）。
常規品質控制區包含無菌實驗區、留樣取樣間、理化實驗室、研發實驗室。
多數工廠其中的無菌實驗區常見的劃分為非潔凈區的準備間及萬級（2013新版GMP中C級）的陽性對照間、無菌檢測間、微生物限度檢測間、其分設的人凈房輔助間（一更洗手、二更穿無菌服、手消緩沖、洗衣、潔具、工位器具洗存）。
3個萬級（2013新版GMP中C級）的陽性對照間、無菌檢測間、微生物限度檢測間中，陽性對照間做相對負壓、空調獨立全新風+過濾后排風；
三個實驗室內配超潔凈工作臺。陽性對照間用生物安全柜與否甲方決定，現行規范無強制要求。
溫濕度規范要求：22±2℃，RH=45%~65%;這有別于低級別的生產區（18~28℃）；是否采用恒溫恒濕空調機？理論上要，就國內多數地區室外氣象參數
PCR基因擴增實驗室工程
PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統，能迅速掌握患者體內的病毒含量，其精確度高達納米級別。
1、必須擁有標準的的PCR熒光實驗室;
實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規PCR相比，它有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前已得到廣泛應用。本文試就其定量原理、方法及參照問題作一介紹
2、檢測設備必須符合標準PCR熒光實驗室設置要求;
熒光定量PCR儀+實時熒光定量試劑+通用電腦+自動分析軟件，構成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統。
3、必須通過國家臨床檢驗中心的驗收和認證;
4、檢測人員必須通過國家臨檢中心業務培訓并取得合格證書;
PCR實驗室內工作人員必須參加由國家衛生部或各省臨床檢驗中心舉辦的臨床基因擴增培訓班，并持證上崗。PCR實驗室通過驗收，實驗室至少必須應有兩個以上持有“臨床基因檢測上崗證”。PCR實驗室必須建立嚴格的實驗室管理制度、建立標準化操作程序（SOP）、建立系列質量管理文件等，確保實驗室日常運行符合國家衛生部的要求，確保檢測結果準確、確保實驗室衛生安全，確保實驗室長期穩定運行
全鋼實驗室臺
采用1.0mm厚，優質雙面鍍鋅鋼板在數控中心、剪裁、定位打孔、折彎焊接后成型。酸洗磷化處理，噴涂環氧樹脂粉末，高溫烘烤固化，附著力高、表面硬度抗腐蝕性強，外形美觀的全鋼實驗室臺，全鋼邊臺是實驗室科研人員可以選擇的實驗室工作臺之一。
產品參數
產品名稱 全鋼實驗室臺 材質 全鋼結構
設計用途 實驗室工作平臺 生產地區
尺寸 根據客戶實際需要X750/1500X850mm 執行標準 實驗室行業標準
產品描述
全鋼實驗室臺，全鋼實驗臺，全鋼邊臺：采用1.0mm厚，優質雙面鍍鋅鋼板在數控中心、剪裁、定位打孔、折彎焊接后成型。酸洗磷化處理，噴涂環氧樹脂粉末，高溫烘烤固化，附著力高、表面硬度抗腐蝕性強，外形美觀的全鋼實驗室臺，全鋼邊臺是實驗室科研人員可以選擇的實驗室工作臺之一。
產品生產工藝簡單介紹如下：
所有鋼板焊接經環氧樹脂噴涂后，目視平整無焊點，所有水、電、氣路安全，適用，隱藏安裝。并在柜體后背板設有維修孔。
產品材料詳細配置說明如下：
1、外殼：采用1.0mm厚，優質雙面鍍鋅鋼板在數控中心、剪裁、定位打孔、折彎焊接后成型，酸洗磷化處理，噴涂環氧樹脂粉末，高溫烘烤固化，附著力高，表面硬度抗腐蝕性強，外形美觀。
2、門板：斜口式，采用1.0mm厚雙面鍍鋅鋼板(雙層)，無焊連接可拆卸帶減震墊。在數控中心、剪裁、定位打孔、折彎焊接后成型。酸洗磷化處理，噴涂環氧樹脂粉末，高溫烘烤固化。 附著力高，表面硬度抗腐蝕性強，外形美觀。
3、把手：不銹鋼亞光把手或者凹字型拉手。
4、鉸鏈：配置廣東東泰DTC鉸鏈，外形美觀，開合無噪音，次數達5萬次以上。防銹、耐腐蝕能力強，達到國際五金行業標準。并配有格拉斯導軌。
5、調整腳：采用10mm注塑調整腳，防震、防潮、耐腐蝕，可根據室內地坪情況適當調節柜體高度，大調節為0—30mm。
6、臺面：12.7mm厚優質實芯理化板，耐酸堿抗腐蝕。
客服1